活性熒光黃FL廣泛應(yīng)用于生物分子標記,通過所見即所得(seeing is believing)的方式跟蹤生物分子,研究功能生物分子的位置和作用。活性熒光黃FL的光強度和光穩(wěn)定性是影響成像質(zhì)量的首要因素,特別是以超高分辨為技術(shù)支撐的單分子熒光成像的快速發(fā)展,對活性熒光黃FL的光強度和光穩(wěn)定性提出了更高的要求。然而,現(xiàn)有的大多數(shù)活性熒光黃FL缺乏足夠的光強度,少數(shù)高熒光強度的染料在光穩(wěn)定性方面的不足限制了對細胞的長時間觀察。理論研究證實,光照扭轉(zhuǎn)分子內(nèi)電荷轉(zhuǎn)移(TICT)是活性熒光黃FL非輻射躍遷的主要方式。針對此問題,該研究團隊通過實驗與理論計算相結(jié)合的方式,將活性熒光黃FL中常用的電子供體二烷基胺變換為三元環(huán)的氮丙啶,由于氮丙啶巨大的環(huán)張力和空間位阻,有效的阻止了染料受光照激發(fā)后TICT態(tài)的形成,從而極大地提高了熒光強度和光穩(wěn)定性。
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